91亚洲欧美-91亚洲欧美综合高清在线-91亚洲区国产区精品区-91亚洲视频在线-91亚洲视频在线观看-91亚洲综合

上海聯(lián)祖生物科技有限公司
公司動(dòng)態(tài)

大鼠腸組織提取物操作流程

發(fā)表時(shí)間:2022-10-13
大鼠腸組織提取物操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。 

1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線。

大鼠成骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基
大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基
大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基
大鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞完全培養(yǎng)基
大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞完全培養(yǎng)基
大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞完全培養(yǎng)基
大鼠皮下脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基
大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基
大鼠表皮黑色素細(xì)胞完全培養(yǎng)基
大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基
大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基
大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基
大鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基
大鼠腦膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基
大鼠神經(jīng)元細(xì)胞完全培養(yǎng)基
大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基
大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞完全培養(yǎng)基
大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基
大鼠腦成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基
大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基
大鼠雪旺氏細(xì)胞完全培養(yǎng)基


聯(lián)系方式
手機(jī):13482402338
Q Q:
二維碼掃描訪問
主站蜘蛛池模板: 白蛇缘起3免费观看 | 成人 在线欧美亚洲 | 久久久亚洲欧美综合 | 免费 高清 日本1在线观看 | 国产精品久久久久久网站 | 久久久国产精品网站 | 久久精品观看影院2828 | 久久久久久影院 | 亚洲伊人精品 | 欧美一级毛片免费网站 | 天天艹天天射 | 九九99久麻豆精品视传媒 | 久久草草 | 国产亚洲一级精品久久 | 日韩a毛片| 成人免费高清视频 | 精品久久中文字幕 | 免费的一级片网站 | 日本 国产 欧美 | 国产精品久久二区三区色裕 | 国产高清对白国产露脸91 | 国产精品久久久久久久久99热 | 欧美男女爱爱视频 | 精品国产hd | 久久国产精品-久久精品 | 一本到视频在线观看 | 亚洲视频成人 | 欧美日韩一卡二卡 | 日韩在线不卡 | 亚洲精品久久久久久久福利 | 国产成人黄色在线观看 | 妇女毛片| 青青青爽线在线视频观看 | 摸逼综合网| 综合久久色 | 交换国产精品视频一区 | 久久99久久99小草精品免视看 | 国产99久久久久久免费看 | 午夜影视在线 | 天堂网一区| 国产美女亚洲精品久久久久久 |