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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4241
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-05
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4241 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
蛤弧菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 | Vibrio tapetis | LZR4241 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
豬鏈球菌拉丁屬名: suis
假單胞菌用途: 微生物肥料
橡膠疫霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
地衣芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus licheniformis
克魯維尼爾巴克利酵母拉丁屬名: Buckleyzyma kluyveri-nielii
非洲黑蛋巢拉丁屬名: Cyathus africanus
南極類芽孢桿菌拉丁屬名: Paenibacillus antarcticus
大腸埃希氏桿菌拉丁屬名: Escherichia coli
海洋伍斯菌拉丁屬名: Woeseia oceanium
淡紫褐鏈霉菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
七角井鹽單胞菌拉丁屬名: Halomonas ?qijiaojingensis
靈芝拉丁屬名: Ganoderma lucidum
果生鏈核盤菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
德里腐霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
米曲霉拉丁屬名: Aspergillus oryzae
蛤弧菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 人干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒英文名稱：Human Stem cell factor/mast cell growth factor，SCF/MGF ELISA Kit 特價(jià)供應(yīng)
人干細(xì)胞因子受體(SCFR)ELISA試劑盒英文名稱：Human Stem Cell Factor Receptor,SCFR ELISA Kit 特價(jià)供應(yīng)
人剛地弓形蟲(chóng)(T.gondii)ELISA試劑盒英文名稱：Human Toxoplasma Gondii,T.gondii ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
Mcl-1(myeloid cell leukemia 1) peptide 髓樣細(xì)胞-1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-phospho-AMPK beta 1(Ser182) 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-B-Raf (Ser444) 磷酸化B-Raf 規(guī)格 0.1ml
Tris- HCl-TWEEN 20緩沖液 100ml 0.5mol/L pH7.6
CD244 英文名稱： CD244 0.2ml
Anti-phospho-IKB alpha (Ser32/36) 磷酸化IKB alpha(Ser32/36)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
MIP-3 Beta/ELC/CCL19(Human Macrophage Inflammatory Protein-3 Beta) ELISA kit 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3βMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-GP65/SDFR1/NPTN 間質(zhì)細(xì)胞衍化因子受體1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Bov IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗IgG 規(guī)格 0.1ml
AT2R(Human Angiotensin II Receptor 2) ELISA Kit 人緊張素Ⅱ受體2 96T
RBBP6 英文名稱： 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤結(jié)合蛋白6 0.1ml
大鼠雌二醇(E2)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Estradiol,E2 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
FOXF1(Forkhead box protein F1) 叉頭蛋白F1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
ALDH7A1 ALDH7A1 兔單抗 (FITC) Human
Rhesus antibody Rh phospho-Dnmt1(Tyr399) 磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1 規(guī)格 0.1ml
BCIP/NBT顯色試劑盒 50ml
ZNF471 英文名稱： 鋅指蛋白471 0.2ml
DKK2 英文名稱： Wnt通路抑制因子2 0.2ml
CRR9 英文名稱： 順氯鉑耐藥相關(guān)蛋白9 0.2ml
Anti-EGF 表皮生長(zhǎng)因子Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Anti-BGP/FITC 熒光素標(biāo)記骨保護(hù)蛋白/骨鈣素IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-GLUT2/FITC 熒光素標(biāo)記葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh CK3 細(xì)胞角蛋白3 規(guī)格 0.1ml
CULLIN (Cdc53/CUL) 0.5mg
SOX13 英文名稱： 胰島細(xì)胞抗原12/核轉(zhuǎn)錄因子SOX13 0.2ml
