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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4243
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-05
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4243 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
田鼠痘病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒說(shuō)明書 | Volepox Virus | LZR4243 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
狹窄刺革菌拉丁屬名: Hymenochaete attenuata
耐鹽枝孢拉丁屬名: Cladosporium halotolerans
巨枝膝梗孢拉丁屬名: Gonytrichum macrocladum
蠟葉曲霉拉丁屬名: Aspergillus herbariorum
異常威克漢姆酵母拉丁屬名: Wickerhamomyces anomalus
根瘤菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
青變色鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces glaucovarians
多色節(jié)桿菌拉丁屬名: Arthrobacter polychromogenes
季也蒙邁耶氏酵母拉丁屬名: Meyerozyma guilliermondii
釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
*芽胞桿菌拉丁屬名: Bacillus infantis
新疆鹽地桿菌拉丁屬名: Salinibacterium xinjiangense
煙曲霉拉丁屬名: Aspergillus fumigatus Fresenius
硬桿菌拉丁屬名: Arthrobacter scleromae
季也蒙假絲酵母拉丁屬名: Candida guilliermondii
田鼠痘病毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明書ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2 Anti-ATP-sensitive K+ channel subunit Kir6.2 0.1ml
Escherichka coli K99 英文名稱： 豬源產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌K99 0.2ml
P選擇素 Anti-P-selectin 0.1ml
Anti-Synapsin II /FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)突觸素2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Met(Tyr1349) 磷酸化肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(原癌基因) 規(guī)格 0.1ml
HIV-1(gp41) 病毒(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
大鼠Smad7 ELISA試劑盒 英文名稱：Rat Mothers against decapentaplegic homolog 7,Smad7 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
CD27 英文名稱： CD27 0.2ml
Anti-DR3/APO3 死亡受體3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
TARC/CCL17(Human thymus activation regulated chemokine) ELISA Kit 人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-GADD34 生長(zhǎng)抑制DNA損傷基因34Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgG/APC APC標(biāo)記的小鼠抗人IgG 規(guī)格 0.1ml
human similar to RIKEN cDNA 4931408D14 gene ELISA kit 人類似RIKEN cDNA 4931408D14 基因 96T
SPRN 英文名稱： 新朊蛋白 0.2ml
Human retinoic acid inducible gene/RIG-like receptor,RLR-9 ELISA Kit 人視黃酸誘導(dǎo)基因/RIG-1樣受體 96T
TRPV2 英文名稱： 辣椒素受體樣蛋白1 0.1ml
CHMP2A 英文名稱： 腺癌標(biāo)志物CHMP2A 0.1ml
Anti-CXCR1/IL-8RA 細(xì)胞表面趨化因子受體1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
小鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Interleukin 23,IL-23 ELISA Kit進(jìn)口/分裝
小鼠白介素27(IL-27)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Interleukin 27,IL-27 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
小鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse Interleukin-2 receptor,IL-2R ELISA Kit進(jìn)口/分裝
CRTAM 英文名稱： CRTAM 0.2ml
Anti-DPP-I 組織蛋白酶CMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
AQP4(aquaporin Protein-4) 水通道蛋白-4(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
anti-Cathepsin B 組織蛋白酶BMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh PCDHGA5 原鈣粘蛋白γA5 規(guī)格 0.2ml
NTRK2 Kit Human 人 Trk-B / NTRK2 ELISA配對(duì) ELISA
phospho-Tau protein(Thr522) 英文名稱： 磷酸化微管相關(guān)蛋白 0.1ml
