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- 品牌：聯祖
- 產地：進口、國產
- 貨號：LZR4288
- 價格： ￥3800/盒
- 發布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-05
| 產地 | 進口、國產 |
| 品牌 | 聯祖 |
| 貨號 | LZR4288 |
| 用途 | 公司產品僅用于科研 |
| 包裝規格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
虎源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒供應商 | 50T | LZR4288 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。
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CD5 英文名稱： CD5 0.1ml
Anti-MCSF Receptor 巨噬細胞集落刺激因子受體Multi-class antibodies規格： 0.1ml
MBP/MBL(Human Mannma binding protein/mannan binding lectin) ELISA Kit 人甘露糖結合蛋白/甘露糖結合凝集素Multi-class antibodies規格： 48T
Anti-P-selectin/CD62p P選擇素Multi-class antibodies規格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HCCR2/LETMD1 原癌基因2 規格 0.2ml
GGT(Human gamma glutamyl transpeptidase) ELISA Kit 人γ谷酰轉移酶 96T
PCNA 英文名稱： 增殖細胞核抗原 0.1ml
AVPR2 英文名稱： 精酸加壓素受體2 0.1ml
Anti-Acinus L/S/FITC 熒光素標記腺泡Acinus L/SIgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml
C I CP(Mouse cross-linked C-telopeptides of Type I collagen) ELISA Kit 小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽Multi-class antibodies規格： 48T
Anti-CA125/Biotin 生物素標記兔抗人CA125抗原IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh DRAK2 DAP凋亡誘導蛋白激酶2 規格 0.2ml
HSV- II IgG 單純Ⅱ型病毒 IgG(間接法二步法)
MTNR1B 英文名稱： 褪黑素受體1B 0.1ml
CTLA4 英文名稱： 細胞毒性T細胞抗原-4 0.2ml
Anti-Protein A 重組蛋白AMulti-class antibodies規格： 0.2ml
LEP(Human Leptin) ELISA kit 人瘦素Multi-class antibodies規格： 48T
anti-Integrin alpha E2 整合素alpha E2 Multi-class antibodies規格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Kif14 protein 驅動蛋白家族Member14蛋白 規格 0.2ml
CP(Human cicatricial Pemphigoid) ELISA Kit 人性天皰瘡 96T
PCMT1 英文名稱： 天門冬酸甲基轉移酶PCMT 0.2ml
