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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
火雞源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR4291
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2025-02-05
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR4291
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

規格

貨號

火雞源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

50T

LZR4291

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

日光鹽場喜鹽芽孢桿菌拉丁屬名: Halobacillus yeomjeoni

賴氏毛殼拉丁屬名: Chaetomium raii

黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus  niger

大腸桿菌拉丁屬名: Escherichia coli

*酸熱脂環酸芽胞桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

分枝節桿菌拉丁屬名: Arthrobacter ramosus

米蘭鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces mediolani

粉紅單端孢注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

膠韌革菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

假諾卡氏屬拉丁屬名: Pseudonocardia aurantiaca

布魯氏菌 生物Ⅱ型拉丁屬名: abortus BiovarⅡ

釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

韓國靈芝注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

地衣芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus  licheniformis

芽胞桿菌用途: 在無機鹽培養基中以50mg/l的吡蟲啉為碳源培養,6天內吡蟲啉降解率30%左右
火雞源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Rhesus antibody Rh Phospho-CRMP2 (Thr514) 磷酸化二氫嘧啶酶樣2 規格 0.1ml

考馬斯亮藍G-250溶液 100ml/500ml 自產

ZFP219 英文名稱: 鋅指蛋白219 0.2ml

DLC1 英文名稱: 胞漿動力蛋白輕鏈1 0.2ml

PRDX6 Peroxiredoxin 6 / PRDX6 鼠單抗 (FITC) Human

E2F4 英文名稱: 轉錄因子E2F-4 0.1ml

轉移生長因子–β2 Anti-TGF-β2 0.1ml

CD56 英文名稱: 神經細胞粘附分子1 0.1ml

Anti-Phospho-MK1/2 (Ser221) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶1/2Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Human coagulation factor VIII related antigen,F VIII -Ag ELISA Kit 人凝血因子Ⅷ相關抗原Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-RNF148 環指蛋白148Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh GSTO1 谷胱甘肽硫轉移酶ω1 規格 0.1ml

SP-A(Human Surfactant Protein A) ELISA Kit 人表面活性蛋白A 96T

SHANK3 英文名稱: 富含脯酸突觸相關蛋白SHANK3 0.2ml

ABAT 英文名稱: γ基丁酸轉酶 0.1ml

Anti-CD244/NKR2B4/SLAMF4/FITC 熒光素標記CD244IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

BF(Mouse factor B) ELISA Kit 小鼠B因子Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-CD4/PE 熒光素PE標記CD4IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh EAAT3 膠質細胞谷氨酸運載蛋白3(神經/上皮細胞谷氨酸運載蛋白) 規格 0.1ml

Beta-HCG 人絨毛膜激素(夾心法一/二步法) 96T

MT-ND1 英文名稱: NADH復合體1 0.2ml

CTR9 英文名稱: 血小板活化因子CTR9 0.2ml

Anti-MASP 甘露聚糖結合凝集素絲氨酸肽酶1Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Pim1(Human proviral integration site 1) ELISA Kit 人前病毒整合位點1Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-IRF3 干擾素調節因子3Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh LHX6 轉錄因子LHX6 規格 0.2ml

TUBB(Human Beta-tubulin) ELISA kit 人β-微管蛋白 96T

PCK1 英文名稱: 磷酸烯醇酸羧激酶 0.2ml

 


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