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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4297
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-05
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4297 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
鹿源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 | 50T | LZR4297 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
玫瑰暗黃鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces roseofulvus
木賊鐮孢拉丁屬名: Fusarium equiseti
土壤短波單胞菌拉丁屬名: Brevundimonas terrae
球孢白僵菌用途: 生物防治
熒光假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas fluorescens
解脂假絲酵母解脂變種拉丁屬名: Candida lipolytica var. lipolytica
谷氨酸棒桿菌拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
微白黃鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces albidoflavus
奧斯陸莫拉氏菌拉丁屬名: Moraxella osloensis
暗產(chǎn)色鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces phaeochromogenes
南方正青霉拉丁屬名: Penicillium meridianum
食酸戴爾福特菌拉丁屬名: Delftia acidovorans
薛瓦酵母拉丁屬名: Saccharomyces chevalieri
甜菜假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas bei
蘇云金芽胞桿菌鲇澤變種用途: 制備抗原標(biāo)準(zhǔn)菌株，毒殺鱗翅目昆蟲
鹿源性成分探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 GSK-3 Alpha (Glycogen Synthase Kinase-3 alpha) 葡萄糖合成激酶-3α抗原(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
S100A7 S100A7 兔單抗 (FITC) Human
Rhesus antibody Rh phospho-CRK (Ser41) 磷酸化CRK 規(guī)格 0.1ml
品名 規(guī)格 備注
ZBTB38 英文名稱： 鋅指蛋白ZBTB38 0.2ml
Desmocollin 1 英文名稱： 橋粒糖蛋白1 0.1ml
S100A7 S100A7 兔單抗 (FITC) Human
CD62L 英文名稱： L選擇素 0.1ml
Anti-GABA 兔抗γ1氨基丁酸Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Fc GammaR II /CD32(Human Receptor II for the Fc region of immunoglobulin G,Fc GammaR II ) ELISA Kit 人免疫球蛋白G Fc段受體ⅡMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-FOXO1 叉頭蛋白O1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse anti-rabbit IgG ascites 小鼠抗兔IgG腹水 規(guī)格 1ml
Beta-LPH(Human Beta-lipotropic hormone) ELISA Kit 人β-促脂素 96T
Semaphorin 5A 英文名稱： 跨膜蛋白SEMA5A 0.2ml
phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr743) 英文名稱： 磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白 0.1ml
Anti-ANG-2/FITC 熒光素標(biāo)記生成素-2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
AQP-1(Mouse Aquaporin 1) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CD163/M130/FITC 熒光素標(biāo)記CD163IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-human IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格 0.1ml
HBsAg 表面抗原 96T
Msx2 英文名稱： 同源盒基因Msx2 0.2ml
Cullin 2 英文名稱： Cullin2 0.2ml
Anti-PCNA-Proliferation Marker 增殖細(xì)胞核抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
GP-II(Human Glycogen phosphorylase II) ELISA Kit 人糖原磷酸化酶同工酶IIMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MIF 巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh IRAK4 白介素-1受體相關(guān)激酶4 規(guī)格 0.2ml
HBXIP(Human hepatitis B virus X interacting protein) ELISA Kit 人病毒X蛋白相互作用蛋白 96T
PCDHGA5 英文名稱： 原鈣粘蛋白γA5 0.2ml
