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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4302
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-05
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4302 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
貓?jiān)葱猿煞痔结樂晒舛縋CR試劑盒規(guī)格 | 50T | LZR4302 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
Sinomonas拉丁屬名: Sinomonas susongensis sp. nov.
慢生根瘤菌拉丁屬名: Bradyrhizobium sp.
黃青霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
副球菌拉丁屬名: Paracoccus sp.
大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli
香菇用途: 栽培
假單胞菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
大毛霉拉丁屬名: Mucor mucedo (Linnaeus) Fresenius
網(wǎng)孢麻孢菌拉丁屬名: Gelasinospora reticulata
橙蓋傘注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
中國(guó)油脂酵母拉丁屬名: Lipomyces chinensis
釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
淡紫擬青霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
葡萄座腔菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
卵孢白僵菌用途: 生物防治
貓?jiān)葱猿煞痔结樂晒舛?/span>PCR試劑盒規(guī)格CHCHD8 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD8 0.2ml
Anti-CD71/TFR 轉(zhuǎn)鐵蛋白受體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
CD147/EMMPRIN(Extracellular matrix metalloproteinase inducer) CD147(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-CCL12/MCP5 單核細(xì)胞趨化蛋白5Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh PCDHA2 原鈣粘附蛋白α2 規(guī)格 0.2ml
CD3D Kit Human 人 CD3d / CD3 delta ELISA配對(duì) ELISA
TM7SF2 英文名稱： 脫氫膽固醇還原酶14 0.2ml
CD68 英文名稱： CD68 0.1ml
Anti-NFKB p65 細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
EMP(Human erythrocyte membrane protein) ELISA Kit 人紅細(xì)胞膜蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Parvalbumin 細(xì)小清蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HAUSP/USP7 病毒相關(guān)泛素特異性蛋白酶7 規(guī)格 0.2ml
FRA(Human fibronection related antigen) ELISA Kit 人纖維連接素相關(guān)抗原 96T
Phospho-PDPK1(Ser393) 英文名稱： 磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-CREB-1(Ser121) 磷酸化CREB-1 規(guī)格 0.1ml
流式用破膜劑 50T Invitrogen原裝
ZIC3 英文名稱： 內(nèi)臟異位相關(guān)蛋白/鋅指蛋白203 0.2ml
DUSP6 英文名稱： 雙特異性蛋白磷酸酶6/原活化蛋白激酶磷酸酶3 0.2ml
SERPINF2 SerpinF2 鼠單抗 (FITC) Human
Ep300 英文名稱： CREB結(jié)合蛋白p300 0.1ml
早老素蛋白-1 Anti-PS-1 0.2ml
Cullin 英文名稱： CULLIN 0.2ml
Anti-Nadrin DysbindinMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
UPAR 大鼠尿激酶樣纖溶酶原活化物受體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Dynamin 2 酶動(dòng)力蛋白2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh NAP1L1 核小體組裝蛋白1 規(guī)格 0.2ml
Human terminal complement complex C5b-9,TCC C5b-9 ELISA Kit 人末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9 96T
SIRT6 英文名稱： 沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白6 0.2ml
