- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR4191
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-02-05
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR4191 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
須毛癬菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Trichophyton mentagrophytes | LZR4191 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
蠟狀芽孢桿菌TXA2 (Thromboxane A2) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus cereus
嗜氣薄層菌Cr (creatinine) ELISA Kit拉丁屬名: Hymenobacter aerophilus
Bacillus IP3 (Inositol Triphosphate) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus
微桿菌MDA (Malondialdehyde) ELISA Kit 拉丁屬名: Microbacterium sp.
伯氏疏螺旋體*LTB4 (Leukotriene B4) ELISA Kit拉丁屬名: Borrelia burgdorferi
*匍枝根霉E1 (Estrone) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
假單胞菌fMet (Formylmethionine) ELISA Kit用途: 分類、研究,具有 生物肥料潛力。
近緣彎孢Cotinine ELISA Kit拉丁屬名: Curvularia affinis
蒙氏假單胞菌E2 (Estradiol) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas monteilii
新疆糖絲菌PGD2 (Prostaglandin D2) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharothrix xinjiangensis
膜醭畢赤酵母SP (Substance P) ELISA Kit拉丁屬名: Pichia membranifaciens
大腸埃希氏菌ASD (Androstenedione) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
絳紅褐鏈霉菌Car (Carnosine) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
帕莫斯托木層孔菌ALD (Aldosterone) ELISA Kit拉丁屬名: Phellinus parmastoi
Rhizobium T (Testosterone) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
須毛癬菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書羊抗小鼠IgG血清 0.5ml 國(guó)產(chǎn)
XPB 英文名稱: DNA損傷修復(fù)酶ERCC3蛋白 0.2ml
DCN/Decorin 英文名稱: 核心蛋白聚糖 0.1ml
Anti-Phospho-5-Lipoxygenase (Ser271) 磷酸化5-脂氧合酶Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Estrogen receptor beta 英文名稱: 雌激素受體β 0.1ml
組織蛋白酶L Anti-cath-L/CL 0.1ml
Anti-UCP-2/FITC 熒光素標(biāo)記線粒體脫偶連蛋白2IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CCR10 英文名稱: 細(xì)胞表面趨化因子受體10 0.1ml
Anti-IL-12 (human) 白介素12(人)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ABAb(Human anti-brain tissue antibody) ELISA Kit 人抗腦組織Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-phospho-IKK gamma (Ser31) 磷酸化KB抑制蛋白激酶γMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MAG-a/L-MAG 髓鞘相關(guān)糖蛋白-a 規(guī)格 0.1ml
Cr(Human Crosslaps) ELISA Kit 人骨膠原交聯(lián) 96T
RSV 英文名稱: 合胞病毒 0.1ml
NR2B (Glutamate receptor) 谷氨酸受體(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒英文名稱:Human pigment epithelium-derived factor,PEDF ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人殺菌肽B(CecB)ELISA試劑盒 英文名稱:Human cecropin B,CecB ELISA Kit進(jìn)口/分裝
人殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒 英文名稱:Human bactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPI ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人殺傷球蛋白樣受體(KIR)ELISA試劑盒 英文名稱:Human killer cell immnoglobulin-like receptor,KIR ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人殺傷細(xì)胞凝集素樣受體(KLR)ELISA試劑盒 英文名稱:Human killer cell lectin-like receptor,KLR ELISA Kit進(jìn)口/分裝
S-100A1 (S100 calcium-binding protein A1) 鈣結(jié)合蛋白S100A1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
CPEB1 英文名稱: 細(xì)胞質(zhì)多聚腺苷酸結(jié)合蛋白1 0.1ml
Anti-NCX1/SLC8A1 鈉鈣交換蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ER(Human Estrogen Receptor) ELISA Kit 人雌激素受體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Leptin receptor(long) 瘦素受體(長(zhǎng))Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh KLRF1/NKp80 細(xì)胞毒性受體NK-p80 規(guī)格 0.2ml
MIP-3 Alpha/CCL20 ELISA Kit 大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α 96T
PRMT1 英文名稱: 蛋白質(zhì)精酸甲基轉(zhuǎn)移酶1 0.1ml