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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4200
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-05
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4200 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
單端孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Trichothecium spp. | LZR4200 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
平流層芽孢桿菌MUC6 (Mucin 6) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus stratosphericus
糞腸球菌CGβ (Chorionic Gonadotrophin Beta) ELISA Kit拉丁屬名: Enterococcus faecalis
紅球菌NOS1/nNOS (Nitric Oxide Synthase 1, Neuronal) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodococcus sp.
青霉屬NOS2/iNOS (Nitric Oxide Synthase 2, Inducible) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium sp.
布魯氏菌NOS3/eNOS (Nitric Oxide Synthase 3, Endothelial) ELISA Kit拉丁屬名: abortus
藤黃微球菌F7 (Coagulation Factor VII) ELISA Kit拉丁屬名: Micrococcus luteus
貪噬菌F9 (Coagulation Factor IX) ELISA Kit拉丁屬名: Variovorax boronicumulans
葉生布勒擔(dān)子酵母F10 (Coagulation Factor X) ELISA Kit拉丁屬名: Bulleribasidium foliicola
平菇F13 (Coagulation Factor XIII) ELISA Kit用途: 食用、藥用
范巴倫氏分支桿菌F12 (Coagulation Factor XII) ELISA Kit拉丁屬名: Mycobacterium vanbaalenii
蘋果黑腐皮殼F5 (Coagulation Factor V/Plasma Factor V) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
淺白隱球酵母F11 (Coagulation Factor XI) ELISA Kit 拉丁屬名: Cryptococcus albidus
大腸埃希氏桿菌COL2 (Collagen Type Ⅱ) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
蠟狀芽孢桿菌COL2α1 (Collagen Type II Alpha 1) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus cereus
魯氏接合酵母COL3α1 (Collagen Type III Alpha 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Zygosaccharomyces rouxii
單端孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商phospho-alpha B Crystallin (Ser59) 英文名稱： 磷酸化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈 0.1ml
Anti-ART/FITC 熒光素標(biāo)記膠質(zhì)細(xì)胞系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子GDNF的一種IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
PSA(Mouse prostate specific antigen) ELISA Kit 小鼠特異性抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CD158b2/KIR2DL3/NKAT2a/FITC 熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞抑制性受體2DL3IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-human IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格 0.1ml
HBcAb(IgM) 核心 IgM 96T
MRGX1 英文名稱： G蛋白偶聯(lián)受體MRGX1 0.1ml
CCZ1 英文名稱： CCZ1蛋白 0.2ml
Anti-claudin 5 緊密連接蛋白-5Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
MMP-13(Human Matrix metalloproteinase 13) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶13Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-OPN 骨橋蛋白(分泌型磷蛋白1)人Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh ICAM5/Telencephalin 細(xì)胞間粘附分子5 規(guī)格 0.1ml
TSH(Mouse Thyroid Stimulating Hormone)ELISA Kit 小鼠促甲狀腺素 96T
PCDH8 英文名稱： 原鈣粘附蛋白8 0.2ml
DNAH7 英文名稱： 軸絲動(dòng)力蛋白7 0.2ml
Anti-beta-Amyloid(1-28) β淀粉樣肽(1-28)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Phospho-EEF2k (Ser359) 英文名稱： 磷酸化真核延伸因子激酶2 0.1ml
雄激素結(jié)合蛋白 Anti-ABP 0.1ml
Anti-WNK3 protein/FITC 熒光素標(biāo)記絲氨酸/蘇氨酸激酶家族成員的基因WNK3IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Filamin A/FLNA (Ser2522) 磷酸化細(xì)絲蛋白A 規(guī)格 0.1ml
Claudin-11 peptide 少突膠質(zhì)細(xì)胞跨膜蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
CPSA(C2F9) 英文名稱： 復(fù)合特異性抗原單克隆 0.2ml
Anti-IFITM1/CD225 干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
P Gamma(Human Peptide Gamma) ELISA Kit 人γ肽Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-hHb 人血紅蛋白單克隆Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh MKRN1/RNF61 環(huán)指蛋白61 規(guī)格 0.2ml
GSK(Human glycogen synthase kinase) ELISA Kit 人糖原合成酶激酶 96T
Resistin 英文名稱： 抵抗素 0.1ml
