- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR4212
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-02-05
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR4212 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
馬媾疫錐蟲探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Trypanosoma equiperdum | LZR4212 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
紫丁香蘑COL2 (Collagen Type Ⅱ) ELISA Kit用途: 松、榛、山楊等樹木形成外生菌根
燕麥鐮刀菌Cys-C (Cystatin C) ELISA Kit拉丁屬名: Gibberella avenacea
刺孢小克銀漢霉輪生變種D-LDH (D-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 拉丁屬名: Cunninghamella echinulata var. verticillata
黃蓋蜜環(huán)菌NOS3/eNOS (Nitric Oxide Synthase 3, Endothelial) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
蜜二糖假絲酵母ET-1 (Endothelin 1) ELISA Kit拉丁屬名: Candida melibiosica
糞產(chǎn)堿桿菌ECF/CCL11 (Eosinophil Chemotactic Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Alcaligenes faecalis
谷氨酸棒桿菌ENA-78 (Epithelial Neutrophil Activating Peptide 78) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
枯草芽孢桿菌SELE (E-Selectin) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
彩色豆馬勃FE (Ferritin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
雙孢蘑菇FSH (follicle-stimulating hormone) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
柄孢殼F-TESTO (Free Testoterone) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
白地霉fT4 (Free Thyroxine) ELISA Kit拉丁屬名: Geotrichum candidum
海底德沃斯氏菌fT3 (Free Triiodothyronine) ELISA Kit拉丁屬名: Devosia subaequoris
平田頭菇GC (Glucagon) ELISA Kit 用途: 食用、科研
園弧青霉=桔灰青霉HB (Hemoglobin) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium cyclopium Westling=Penicillium aurantiogriseum
馬媾疫錐蟲探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商CD339/Jagged1 CD339/Jagged1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
大鼠脫氫表雄酮(DHEA)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Dehydroepiandrosterone,DHEA ELISA Kit進(jìn)口/分裝
大鼠脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Dehydroepiandrosterone S7,DHEA-S7 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
大鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒英文名稱:Rat deoxypyridinoline,DPD ELISA Kit 特價(jià)促銷
大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒英文名稱:Rat advanced glycation end products,AGEs ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
大鼠網(wǎng)膜素(omentin)ELISA試劑盒英文名稱:Rat omentin ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
sFRP-4(Secreted frizzled-related protein 4; Frizzled protein, human endometrium) 抗子宮內(nèi)膜抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
CD147 英文名稱: 細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子 0.1ml
Anti-EphB6 酪氨酸蛋白激酶受體B6Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rat Caspase-9 大鼠Caspase-9Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-phospho-Ephrin B (Tyr331) 磷酸化Ephrin BMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MUC13 粘蛋白13 規(guī)格 0.2ml
BCR(Human B cell receptor) ELISA Kit 人B細(xì)胞受體 96T
SCN2A 英文名稱: SCN2A 0.1ml
人可溶性CD30配體(sCD30L)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Soluble Cluster of differentiation 30 ligand,sCD30L ELISA Kit 進(jìn)口/原裝
IL-1 ELISA Kit 大鼠白介素1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Rat IgA/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗大鼠IgAMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Fibulin 5 衰老關(guān)鍵蛋白 規(guī)格 0.2ml
TrxR(Mouse thioredoxin reductase) ELISA Kit 小鼠硫氧還蛋白還原酶 96T
Uromucoid 英文名稱: 尿調(diào)節(jié)蛋白 0.2ml
ABL2 英文名稱: ABL2蛋白 0.1ml
CREB3L3 英文名稱: 環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白H 0.2ml
Anti-Phospho-Nur77 (Ser351) 磷酸化孤兒核受體蛋白Nur77Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
GSK(Human glycogen synthase kinase) ELISA Kit 人糖原合成酶激酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Nrf2 核因子2相關(guān)因子2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh IGF I 樣生長因子1 規(guī)格 0.1ml
CT-1(Mouse cardiotrophln 1)ELISA Kit 小鼠心肌營養(yǎng)素1 96T
PTK5 英文名稱: 胃腸道相關(guān)酪酸激酶(蛋白酪酸激酶5) 0.2ml