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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4272
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-05
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4272 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
大鼠源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | 50T | LZR4272 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
大腸桿菌用途: 研究DNA損傷機(jī)制及其啟動子活性。
真姬菇用途: 用于科研教學(xué)。
紫色鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces violaceus
費(fèi)希爾曲霉拉丁屬名: Aspergillus fischeri
產(chǎn)氣莢膜梭菌 毒素A型拉丁屬名: perfringens Type A
蕓薹生鏈格孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
皺褶青霉拉丁屬名: Penicillium rugulosum
耐多抗諾卡氏菌拉丁屬名: Nocardia polyresistens
長孢洛德酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
卷枝毛霉卷枝變型拉丁屬名: Mucor circinelloides f. circinelloides
安大略假絲酵母拉丁屬名: Candida ontarioensis
泡盛曲霉拉丁屬名: Aspergillus awamori
阿爾通山堿線菌拉丁屬名: Natrinema altunense
膠孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
食吡啶紅球菌拉丁屬名: Rhodococcus pyridinivorans
大鼠源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商Centaurin beta 2 英文名稱： CENTB2蛋白 0.1ml
Anti-CSP 環(huán)子孢子蛋白(約氏)Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml
FGF-6 human 人成纖維生長因子-6Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CNGA2 環(huán)核苷酸陽離子通道蛋白α2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh NOX4/NADPH oxidase 4 NADPH氧化酶4 規(guī)格 0.1ml
human HMGB-1 ELISA Kit 人高遷移率族蛋白B1 ELISA Kit 96T
TMEM16A 英文名稱： 跨膜蛋白16A/鈣激活氯離子通道 0.1ml
CD40L 英文名稱： CD40L 0.1ml
Anti-Phospho-NPM (Ser4) 磷酸化核仁磷酸蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
ADAMTS4(Human ADAM metallopeptidase with thrombospondin type 1 motif4) ELISA Kit 人ADAM金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1基元4Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-phospho-PAK1/2/3(Thr423) 磷酸化p21激活激酶1/2/3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HOXD10 同源盒蛋白HOXD10 規(guī)格 0.2ml
AGA(Human anti-gliadin antibody) ELISA Kit 人抗麥膠蛋白/麥醇溶蛋白 96T
phospho-PI3 kinase p85 alpha + gamma (Tyr467 + Tyr199) 英文名稱： 磷酸化磷脂酰肌醇激酶 0.1ml
CHMP5 英文名稱： 染色質(zhì)修飾蛋白CHMP5 0.1ml
Anti-Phospho-Connexin 43 (Ser368) 磷酸化Connexin 43蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
6His-Tag 6個組氨酸Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CK8 細(xì)胞角蛋白8Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh NR2D/NMDAR2D 谷氨酸受體2D 規(guī)格 0.1ml
Tris 三羥甲基基甲烷 100g
TIAF1 英文名稱： TGFB1誘導(dǎo)抗凋亡因子1 0.2ml
CTAG2 英文名稱： /抗原2 0.2ml
Anti-L-enk 亮氨酸腦啡肽Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
16- Alpha OHE-1(Human 16- AlphaHydroxyestrogen 1) ELISA Kit 人16α羥基雌酮1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Lgr5/GPR49 Lgr5/GPR49Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh KLK9 激肽釋放酶9(舒素9) 規(guī)格 0.1ml
iso-Hyd(Human Isoprenaline Hydrochloride) ELISA Kit 人異丙 96T
Phospho-p90RSK (Thr359 + Ser363) 英文名稱： 磷酸化絲酸/蘇酸激酶p90RSK蛋白 0.1ml
