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細(xì)胞名稱 人小細(xì)胞；NCI-H2227

形態(tài)特性: 上皮樣

生長特性: 該細(xì)胞既有懸浮生長，又有貼壁生長

特征特性: 該細(xì)胞是1989年8月從一名54歲白人男性小細(xì)胞灶中分離得到的。

培養(yǎng)條件: DMEM/F12(1:1):Ham＇sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)5%FBS；0.005mg/ml胰島素＋0.01mg/ml轉(zhuǎn)鐵蛋白＋30nM*＋10nM氫化可的松＋10nMβ-雌二醇＋10nMHEPES＋2nML-谷氨酰胺

傳代方法: 1:2~1:4傳代；每周換液2次。

傳代情況:

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。

（一）如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
注意事項：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

布魯氏菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格：>98.5%，I晶型 Agomelatine

沙門氏菌、志賀氏菌和金黃色葡萄球菌三重核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格：>99% Piracetam

牛源性成分核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格：>98.5% Ramelteon

羊源性成分核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格：>98% Lacosamide

豬源性成分核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格：>98% Milnacipran

雞源性成分核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Milnacipran

禽源性成分核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格：>99% Tetrabenazine

馬源性成分核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Tetrabenazine

驢源性成分核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格：>99% Vigabatrin

牛羊源性成分二重核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格：>98% O-Desmethylvenlafaxine(DL)

核酸提取試劑系列 規(guī)格：>99%,BR Flumethasone

高耐受taq聚合酶 規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Flumethasone

ZYD-NP12D 農(nóng)藥殘留快速檢測儀 規(guī)格：>98%,BR Ritodrine HCl

ZYD-NP6D 農(nóng)藥殘留快速檢測儀 規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ritodrine HCl

農(nóng)藥殘留檢測卡 規(guī)格：>97% Indinavir sulfate

Isocorynoxeine酞菁鐵(II)(升華提純)(>98.0%(T))  分子式：C15H22O4  性狀：Cryst.  純度：97.5%

Naringenin酞菁(>93.0%(N))  分子式：C15H26O  性狀：Oil  純度：%

HYOSCINE HYDROCHLORIDE顏料藍(lán)15,酞菁藍(lán)B  分子式：C17H22O4    純度：95.0%

Lupeol顏料綠 7  分子式：C15H28O2  性狀：Cryst.  純度：98.0%

Isosakuranetin酞菁鉛(II)(>95.0%(T))  分子式：C15H22O3  性狀：Solid  純度：%

Isochlorogenic acid A酞菁鋅(>95.0%(T))  分子式：C15H24O2  性狀：Oil  純度：%

Sanguinarium chloride酞菁鐵(II)(>95.0%(T))  分子式：C15H22O3    純度：96.5%

Isophorone酞菁二鈉  分子式：C15H22O2    純度：97.5%

Cinnamyl acetate二氯酞菁錫(IV)  分子式：C19H32O7  性狀：Oil  純度：93.0%
人小細(xì)胞；NCI-H2227說明書C-KIT mRNA原位雜交試劑盒

規(guī)格:100T/盒

特異性: 、、、雞

標(biāo)記方式: 3’—尾段標(biāo)記

保存條件: 4°C保存一年

資源名稱嗜熱乳酸鏈球菌

種屬:StreptococusthermophilusOrla-Jensen