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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
Cas9穩定表達的人細胞;PC-3-Cas9-576供應商
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZX9316
  • 發布日期: 2020-12-17
  • 更新日期: 2025-02-05
產品詳請
產地 進口、國產
保存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
品牌 聯祖
貨號 LZX9316
用途 公司產品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細胞形態 上皮樣
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 A型
品系 詳見說明書
生長狀態 貼壁生長,在軟瓊脂中成簇生長,并可懸浮生長
物種來源 詳見說明書
包裝規格
純度 %
是否進口

傳代方法:

產品僅用于科研收到細胞后,取出培養瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。

(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶,吸出培養液,僅留下10ml培養液在瓶內繼續培養。。

(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養。具體步驟如下:

1. 棄去培養液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,倒轉放于37度培養箱1-3分鐘預熱,然后又將培養瓶倒轉大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養培養瓶,細胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養基,吸出,分到新的培養瓶中。一傳二。

注意:傳代后一半用我們的培養基,一半用你們的,以免細胞不適應而造成生長不好。

產品名稱

Cas9穩定表達的人細胞;PC-3-Cas9-576供應商

生長特性

貼壁生長,在軟瓊脂中成簇生長,并可懸浮生長

貨號

LZX9316

細胞名稱 Cas9穩定表達的人細胞;PC-3-Cas9-576

形態特性: 上皮樣

生長特性: 貼壁生長,在軟瓊脂中成簇生長,并可懸浮生長

特征特性: 該細胞是采用慢病毒感染的方式使PC-3細胞穩定表達Cas9-Flag-Neo,經400ug/mlG418篩選得到的單,經WesternBlotting驗證該可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。

培養條件: F12K10%FBS;400ug/mlG418

傳代方法: 1:3~1:6傳代;每周2~3次換液。

傳代情況: C3

凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

 


注意事項:

1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。

2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。

3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。

4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管完全吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。

6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。

7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。

 

操作要點:

1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。

2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內完全解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。

5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。

6)產品僅用于科研觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
特別聲明:本產品及我公司所售其他產品均為科研類試劑產品,嚴禁用于藥物、醫療及其他非科研用途。

GRK2 (PhosphoSer685) Polyclonal Antibody G蛋白偶合受體激酶2(Ser685)抗體

GRK2 Polyclonal Antibody G蛋白偶合受體激酶2抗體

GNB1L Polyclonal Antibody G蛋白β樣蛋白1抗體

LST8 Polyclonal Antibody G蛋白β樣蛋白抗體

GDS1 Polyclonal Antibody G蛋白GTPGDP解離刺激因子1抗體

GBRR2 Polyclonal Antibody G基丁A型受體rho2抗體

GBRR1 Polyclonal Antibody G基丁A型受體rho1抗體

GZF1 Antibody (CT) (GDNFinducible zinc finger protein 1, ZNF336, ZBTB23) GZF1抗體(C末端)

Guanosine Antibody (Deoxyguanosine) Guanosine抗體

GIMA7 Polyclonal Antibody GTP酶IMAP家族成員7抗體

KCNE1L  離子通道蛋白家族成員1樣蛋白抗體    特價促銷 0.2ml CAL101 (GS1101)

KCNE2  離子通道蛋白家族成員2抗體    特價促銷 0.2ml OtertButylLthreonine

KCNJ5  G蛋白激活內向通道5抗體    特價促銷 0.2ml Ldopa,Levodopa

C11ORF46  11號染色體開放閱讀框46抗體    特價促銷 0.2ml Ldopa

C11ORF67/PTD015  11號染色體開放閱讀框67抗體    特價促銷 0.2ml LaAminoadipic acid

C11ORF77/HARBI1  11號染色體開放閱讀框77抗體    特價促銷 0.2ml LCyclopropylalanine

C11ORF16  11號染色體開放閱讀框16抗體    特價促銷 0.2ml LHomophenylalanine

C11orf21  11號染色體開放閱讀框21抗體    特價促銷 0.2ml LPipecolic acid
Cas9穩定表達的人細胞;PC-3-Cas9-576供應商正常上皮細胞;RNCEC/HL-028RatNormalColonicEpithelialCellsRNCEC/HL-028Anti-CDK1 Polyclonal Antibody 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長特征特性: 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次

正常上皮細胞;HNPEC/HL-022HumanNormalProstateEpithelialCellsHNPEC/HL-022Anti-CUL1 Polyclonal Antibody 上皮樣生長特性: 貼壁生長特征特性: 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次

正常乳腺上皮細胞;HNBEC/HL-021HumanNormalBreastEpithelialCellsHNBEC/HL-021Anti-COMMD1 Polyclonal Antibody 上皮樣生長特性: 貼壁生長特征特性: 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次

 


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