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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
MDHm線粒體蘋果酸脫氫酶測(cè)試劑盒微量法
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:國(guó)產(chǎn)
  • 型號(hào):50管/48樣
  • 貨號(hào):LZ-01582S
  • 發(fā)布日期: 2021-02-24
  • 更新日期: 2025-02-05
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 國(guó)產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號(hào) LZ-01582S
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
英文名稱
包裝規(guī)格 50管/48樣
純度 %
CAS編號(hào)
別名 線粒體蘋果酸脫氫酶(MDHm)測(cè)試盒
分子式
是否進(jìn)口



血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說明!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測(cè)方法

貨號(hào)

MDHm線粒體蘋果酸脫氫酶測(cè)試劑盒微量法

50管/48樣

紫外分光光度法

LZ-01582S

商品介紹:

測(cè)定意義
乙酰輔酶A廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中。是生物體能源物質(zhì)代謝過程中產(chǎn)生的一種重要的中間代謝產(chǎn)物。在體內(nèi)能源物質(zhì)代謝中是一個(gè)樞紐性的物質(zhì)。糖、脂肪、蛋白質(zhì)三大營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)通過乙酰輔酶A匯聚成一條共同的代謝通路-三羧酸循環(huán)和氧化磷酸化,經(jīng)過這條通路氧化生成二氧化碳和水,釋放能量用于ATP合成。此外,乙酰輔酶A是合成脂肪酸,酮體,膽固醇及其衍生物等生理活性物質(zhì)的前體物質(zhì)。

測(cè)定原理

蘋果酸脫氫酶可催化蘋果酸和NAD生成草酰乙酸和NADH。檸檬酸合酶可催化乙酰輔酶A和草酰乙酸生成檸檬酸和輔酶A。利用蘋果酸脫氫酶和檸檬酸合酶的偶聯(lián)反應(yīng),乙酰輔酶A含量和NADH的生成速率成正比,340nm下吸光值的上升速率反應(yīng)了乙酰輔酶A含量的高低。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
2、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
3、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
4、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
5、實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。
6、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
7、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
8、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
9、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。
10、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。

選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。

操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。

中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞;CHL[Phe2,Orn8]-催產(chǎn)素質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR[Phe2,Orn8]-Oxytocin

BxPC-3細(xì)胞,人原位腺癌細(xì)胞 人皮膚纖維微細(xì)胞系,Malmc細(xì)胞 小鼠漿細(xì)胞瘤;MPC-11[Ser4,Ile8]-催產(chǎn)素質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR[Ser4,Ile8]-Oxytocin

HT-1080(人纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2[Tyr34]-甲狀旁腺激素(7-34) 酰胺 (牛)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR[Tyr34]-pTH (7-34) amide (bovine)

Gibco 17104019 Collagenase Type IV 1g[Trp4]-Kemptide質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR[Trp4]-Kemptide

人髓核細(xì)胞裂解物HNPCL(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Coumarin
人胚;MRC-5氧化型輔酶Ⅱshēng huà shì jì容量:RT25克

HA Others H5N8 甲型 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 5-溴尿嘧啶 5-BroMourccil;5-BroMo-2,4(1H,3H)-pyriMidinqdionq; 21-0-7

NSC,大鼠神經(jīng)干細(xì)胞溴紫葡萄糖肉湯shēng huà shì jì容量:25克

CD38 Others Human 人 SCARB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 抗生素Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基(Ph6.5~6.6)shēng huà shì jì容量:RT25克

大鼠視網(wǎng)膜微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLRhamnose 5g/10g/100g 國(guó)產(chǎn)
EPHA3 Others Human 人 EphA3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 辛伐他汀二聚體雜質(zhì)Simvastatin Dimer Impurity質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

臍內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)辛伐他汀,1-芘乙酰酯Simvastatin, 1-Pyreneacetyl Ester質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

JK(Jurkat)細(xì)胞,人細(xì)胞瘤細(xì)胞 615小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性瘤株,L615細(xì)胞 人平滑肌細(xì)胞裂解物HCSMCL2,3-脫氫辛伐他汀酸鈉鹽2,3-Dehydro Simvastatin Acid  Salt質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

NCI-H2227(人小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2脫氫辛伐他汀Dehydro Simvastatin質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

Calu-3(人) 5×106cells/瓶×2 CL-0062CHO-K1(倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞亞株)5×106cells/瓶×2 正常小鼠Leydig細(xì)胞;TM36'-羧基辛伐他汀6'-Carboxy Simvastatin質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
MDHm線粒體蘋果酸脫氫酶測(cè)試劑盒微量法AsPC-1(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R091大鼠成骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KM0501本氧基醋酸,英文名或英文縮寫:pxenoxyacetic acid,級(jí)別:CP,97%,規(guī)格:5毫升

CM-H047人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL重醋銨;重醋铔,氮輕紅礬, cMMoniuM dichroMctq7789-9-2

PDHA1 Others Human 人 PDHA1 / C54G1 (aa 30-390) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 氘代二錄烷-D2 DICHLOROMqTHcNq-D2 1662-00-2

人少突膠質(zhì)細(xì)胞HO6-溴己酸,英文名或英文縮寫:6-Bromohexanoic acid,級(jí)別:AR,98%,規(guī)格:5克

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3 人細(xì)胞,A-704細(xì)胞 AGS(胃腺癌細(xì)胞)BisBenzimideHoechstNo.33342 25mg/100mg/500mg Sigma B2261


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