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抗體的制備過(guò)程：

1. 免疫原：普通的大分子蛋白，聯(lián)祖通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫動(dòng)物：常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量 時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集：一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采血，家兔、山羊、綿羊可采用采血。

4. 免疫血清的純化與鑒定：得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。

5. 免疫血清的保存：抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。

別 名 Serpin peptidase inhibitor clade A member 4; Kallikrein binding protein; Kallikrein inhibitor; Protease inhibitor 4; Serpin A4; KAL; Kallikrein binding protein; Kallikrein inhibitor; KBP; KLST; KST; MGC108582; PI4; Protease inhibitor 4; Serpin A4; Serpin peptidase inhibitor clade A member 4; SERPINA4; KAIN_HUMAN.

純化方法 affinity purified by Protein A

儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide

產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 

產(chǎn)品名稱	激肽釋放酶抑制劑抗體0.1ml/100μg0.2ml/200μg
英文名稱	Anti-KLST/Kallistatin
貨號(hào)	LZK65064

英文名稱 Anti-KLST/Kallistatin

中文名稱 激肽釋放酶抑制劑抗體

濃 度 1mg/1ml

規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg

抗體來(lái)源 Rabbit

克隆類型 polyclonal

交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat

產(chǎn)品類型 一抗

研究領(lǐng)域 心 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 生長(zhǎng)因子和激素

蛋白分子量 predicted molecular weight: 49kDa

性 狀 Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human KLST/Kallistatin (161-220aa)

亞 型 IgG

免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟：

一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：

磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。

二、實(shí)驗(yàn)步驟

1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。

2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其完全覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。

3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過(guò)0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。

4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。

5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。

 

抗體分子標(biāo)記技術(shù)：

（一）原理

當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。

（二）準(zhǔn)備

1.試劑

經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應(yīng)終止緩沖液；

2.儀器

凝膠過(guò)濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。

（三）操作要點(diǎn)

1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行；

2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。

喹乙宗標(biāo)準(zhǔn)品純度：≥98%MMP-17(Matrix metalloproteinase-17  2g基質(zhì)金屬蛋白酶-17抗原

鹽喹那普利標(biāo)準(zhǔn)品純度：≥97%MMP-2  基質(zhì)金屬蛋白酶-2(多肽抗原  1g

鹽阿的平標(biāo)準(zhǔn)品純度：≥97%MMP-20(matrix metalloproteinase 20  1g基質(zhì)金屬蛋白酶20抗原

槲皮素標(biāo)準(zhǔn)品純度：≥97%MMP-26(Matrix metalloproteinase-26  5g基質(zhì)金屬蛋白酶-26抗原

夸相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品純度：≥98%MMP-3(matrix metalloproteinase-3/Transin-1/SL-1/Stromelysin-1 precursor  1g  

夸標(biāo)準(zhǔn)品純度：≥98%MMP-7(Matrilysin/matrix metalloproteinases-7  5g  

雙羥撲蟯寧標(biāo)準(zhǔn)品純度：≥97%MMP9  基質(zhì)金屬蛋白酶9 1gMMP9  基質(zhì)金屬蛋白酶9

丙標(biāo)準(zhǔn)品純度：≥97%MMP-9(matrix metalloproteinase 9  5G基質(zhì)金屬蛋白酶-9抗原

乙嘧啶標(biāo)準(zhǔn)品純度：≥95%MMP-9(matrix metalloproteinase 9  25G  

馬來(lái)吡拉明標(biāo)準(zhǔn)品純度：≥99%MOG35-55 (myelin oligo-dendrocyte glycoprotein-MOG  100mg  

溴吡斯的明標(biāo)準(zhǔn)品純度：≥97%Morphine/BSA  與牛血清白蛋白偶聯(lián)物 1gMorphine/BSA  與牛血清白蛋白偶聯(lián)物

除蟲(chóng)菊提取物標(biāo)準(zhǔn)品純度：≥97%Morphine/KLH  與血藍(lán)蛋白偶聯(lián)物 1mgMorphine/KLH  與血藍(lán)蛋白偶聯(lián)物

吡嗪酰標(biāo)準(zhǔn)品純度：97%mouse IgA  小鼠IgA 1mgmouse IgA  小鼠IgA

雙羥噻嘧啶標(biāo)準(zhǔn)品純度：≥98%MPO peptide  髓過(guò)氧物酶抗原 1mgMPO peptide  髓過(guò)氧物酶抗原

水楊梅提取物標(biāo)準(zhǔn)品純度：≥97%MRP1(Multidrug Resistanec-Associated Protein 1  1mg  
亞精合酶(SRM)抗體  ELISAKitforSpermidineSynthase(SRM)  規(guī)格：48T/96T  

丙二(MDA)抗體  ELISAKitforMalondialdehyde(MDA)  規(guī)格：48T/96T  

轉(zhuǎn)錄子20(TCF20)抗體  ELISAKitforTranscriptionfactor20(TCF20)  規(guī)格：48T/96T  

Ets變異體2(ETV2)抗體  ELISAKitforEtsVariant2(ETV2)  規(guī)格：48T/96T  

O-6-甲基鳥(niǎo)嘌呤DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(MGMT)抗體  ELISAKitforO-6-MethylguanineDNAMethyltransferase(MGMT)  規(guī)格：48T/96T  

白細(xì)胞激活黏附子(ALCAM)抗體  ELISAKitforActivatedLeukocyteCellAdhesionMolecule(ALCAM)  規(guī)格：48T/96T  

絲蛋白Cγ(FLNC)抗體  ELISAKitforFilaminCGamma(FLNC)  規(guī)格：48T/96T  

鈣黏蛋白23(CDH23)抗體  ELISAKitforCadherin23(CDH23)  規(guī)格：48T/96T  

氫/鉀離子交換ATP酶β肽(ATP4β)抗體  ELISAKitforATPase,H+/K+ExchangingBetaPolypeptide(ATP4b)  規(guī)格：48T/96T  

白三C4(LTC4)抗體  ELISAKitforLeukotrieneC4(LTC4)  規(guī)格：48T/96T  

熱休克轉(zhuǎn)錄子4(HSF4)抗體  ELISAKitforHeatShockTranscriptionFactor4(HSF4)  規(guī)格：48T/96T  

生成素1(ANGPT1)抗體  ELISAKitforAngiopoietin1(ANGPT1)  規(guī)格：48T/96T  

生成素樣蛋白4(ANGPTL4)抗體  ELISAKitforAngiopoietinLikeProtein4(ANGPTL4)  規(guī)格：48T/96T  

GATA結(jié)合蛋白3(GATA3)抗體  ELISAKitforGATABindingProtein3(GATA3)  規(guī)格：48T/96T  

激肽釋放酶抑制劑抗體0.1ml/100μg0.2ml/200μg核子κB受體激活子(RANκ)抗體  ELISAKitforReceptorActivatorOfNuclearFactorKappaB(RANk)  規(guī)格：48T/96T  

亮氨酰/半胱氨酰氨肽酶(LNPEP)抗體  ELISAKitforLeucyl/CystinylAminopeptidase(LNPEP)  規(guī)格：48T/96T  

布皮質(zhì)素2(BEST2)抗體  ELISAKitforBestrophin2(BEST2)  規(guī)格：48T/96T